|
УДК:619:618.19+619:618.145:637.12.04/.07
|
|
|
06.02.00 Ветеринария и зоотехния |
|
|
СОЧЕТАННАЯ ПАТОЛОГИЯ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭНДОМЕТРИЯ У КОРОВ И ЕЁ ВЛИЯНИЕ НА БЕЛКОВЫЙ КОМПОНЕНТ МОЛОКА |
COMBINED PATHOLOGY OF BREAST, ENDOMETRIAL IN COWS AND ITS EFFECT ON PROTEIN COMPONENT OF MILK
|
|
Павленко Ольга Борисовна, доктор биологических наук, профессор кафедры акушерства, анатомии и хирургии ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I», SPIN-код: 1937-8669, AuthorID: 402612 адрес: Россия, 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1,тел. 89066743602 Email: kobra_64.64@mail.ru. |
Pavlenko Olga Borisovna,Dr.Sci.Biol., associate professor, professor of department of obstetrics, anatomy and surgery of Voronezh State Agricultural University of emperor Peter I, SPIN-код: 1937-8669, AuthorID: 402612 address: 394087, Voronezh, the Russian Federation, Michurin St., 1, + 7(473) 2 55-83-02, e-mail: kobra_64.64@mail.ru, |
|
Хромова Любовь Георгиевна, доктор сельскохозяйственных наук, профессор кафедры частной зоотехнии, ФГБОУ ВО «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I», SPIN-код: 7896-7130, AuthorID: 693355 адрес: Россия, 394087, г. Воронеж, ул. Мичурина, 1,+7(920)225-07-35, e-mail: hromovva@yandex.ru. |
KhromovaLyubovGeorgiyevna, doctor of agricultural sciences, associate professor, professor of department of private zootechnics of Voronezh State Agricultural University of the emperor Peter I, SPIN-код: 7896-7130, AuthorID: 693355 address: 394087, Voronezh, the Russian Federation, Michurin St., 1, + 7(920)225-07-35, e-mail: hromovva@yandex.ru |
|
Аннотация. Проведены исследования по одновременному изучению гематологического, биохимического и иммунологического состава крови коров, белкового компонента молока и гистологической структуры молочной железы и эндометрия у больных коров как с субклиническим маститом, так и с сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита. Выявлено, что показатели крови имели отклонения от физиологической нормы, а иммунные реакции организма были снижены, при этом отмечали увеличение процента палочкоядерных нейтрофилов, лейкоцитоз, а также лимфоцитопению, повышение процента эозинофилов, сопровождающиеся снижением альбуминов, β-глобулинов, увеличением α- и γ- глобулиновых фракций, снижалась активность окислительно-восстановительных процессов, снижался уровень резистентности организма с нарушением гомеостаза, что указывало на наличие острого воспалительного процесса в организме животных. При этом воспалительный процесс у коров с сочетанной патологией протекал более выражено. При гистологическом исследовании молочной железы установлено, что альвеолы преимущественно были полиморфными, различной величины и содержали серозную жидкость с обилием жировых и молочных включений. Местами альвеолярные перегородки расширялись за счет рыхлой соединительной ткани и кровеносных капилляров. Лактоциты местами вакуолизировались и значительно отторгались от базальной мембраны альвеол. При этом с возрастанием количества соматических клеток в молоке увеличивалось содержание сывороточных белков, но снижалось количество казеинов. Из-за разбалансированности незаменимых аминокислот и наличия лимитирующей аминокислоты триптофан белковый компонент исследуемого молока имел невысокую биологическую ценность, и с повышением концентрации соматических клеток в молоке это выражалось в большей степени. |
Summary.Researches on simultaneous studying of hematologic, biochemical and immunological composition of blood of cows, a proteinaceous component of milk and histologic structure of a mammary gland and endometrium at sick cows both with subclinical mastitis, and with the combined course of subclinical mastitis and postnatal endometritis are conducted. It is revealed that indicators of blood had deviations from physiological norm, and immune reactions of an organism were reduced at the same time noted increase in percent of stab neutrophils, лейкоцитозand also the limfotsitopeniya, increase in percent of eosinophils which are followed by decrease in albumine, β-globulins, increase α-and γ-globulinovy fractions the activity of oxidation-reduction processes decreased, the level of resistance of an organism with violation of a homeostasis decreased that indicated existence of sharp inflammatory process in an organism of animals. At the same time inflammatory process at cows with the combined pathology proceeded is more expressed. At a histologic research of a mammary gland it is established that alveoluses mainly were polymorphic, various size and contained serous liquid with abundance of fatty and dairy inclusions. In places alveolar partitions extended at the expense of friable connecting fabric and blood capillaries. Laktotsitavakuolizirovatsya in places and were considerably torn away from a basal membrane of alveoluses. At the same time with increase of quantity of somatic cages in milk the content of serumal proteins increased, but the amount of caseins decreased. Because of unbalance of irreplaceable amino acids and availability of the limiting amino acid tryptophane the proteinaceous component of the studied milk had low biological value, and with increase in concentration of somatic cages in milk it was expressed more.
|
|
Ключевые слова. Субклинический мастит, эндометрит, молочная железа, белковый компонент. |
Keywords.Subclinical mastitis, endometritis, mammary gland, proteinaceous component.
|
Введение. По данным многих авторов воспаление слизистой оболочки матки у крупного рогатого скота в послеродовой период - одна из самых распространенных патологий в большинстве животноводческих хозяйств [1,3], возникающее как на почве задержания последа или при родах, так и на почвеинфекционных заболеваний, сопровождается значительным снижением удоя и, как правило, воспалением молочной железы [2,6]. При мастите изменяются состав и свойства молока и большим изменениям подвержен белок молока [7].
Целью настоящих исследований явилось изучение состояния гомеостаза, белкового компонента молока, гистоструктуры больных животных при сочетанной патологии, при данной патологии у коров в сравнительном аспекте.
Материал и методика
Материалом служили образцы вымени и матки от 7, а пробы крови и молока от 24 коров (здоровых коров, больных субклиническим маститом и одновременно субклиническим маститом и острым послеродовым эндометритом). Материал для световой микроскопии фиксировали в 10,0% растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа, обезвоживали в спиртах, хлороформе, заливали в парафин, готовили срезы на микротоме МПС-2 толщиной 5-7 мкм, депарафинировали и окрашивали гематоксилин-эозином, по Ван-Гизон, азур-2 в сочетании с фуксином основным и толлуидиновым синим. Эндометрит у коров устанавливали с использованием клинических и лабораторных методов исследований. Мастит диагностировали начиная с 4 дня после отела у коров с использованием клинических методов исследований и KerbaTest.Реакцию учитывали по степени образования желеобразного сгустка, который является основным критерием оценки реакции, а также по дополнительному признаку — изменению цвета смеси. Кровь исследовали на 1-3 и 10-14 дни после отела у коров, болеющих послеродовым эндометритом и субклиническим маститом. Исследования белкового компонента молока проводилось на 14 день после отела коров. Массовую долю белка определили формольным методом Къельдаля, казеина — методом Маттипуло, сывороточных белков — расчетным способом [7]. Аминокислотный состав идентифицировали методом жидкостной хроматографии на хроматографе Shimadzu LC-20 Prominence (Япония). При расчете биологической ценности белка использовали рекомендованную (ФАО, 2011) методику определения аминокислотного скора с учетом биологической доступности отдельных незаменимых аминокислот и уточненную формулу эталонного белка [8,9]. Гематологические исследования были проведены по общепринятым методам, а биохимические – в соответствии с «Методическими указаниями по применению унифицированных биохимических методов исследований крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях» [4].
Полученный в ходе исследований цифровой материал обработан методом вариационной статистики по алгоритмам с использованием компьютерной программы MicrosoftOffice «Excel».
Результаты и их обсуждение
Для проведения исследований методом пар-аналогов были сформированы 3 группы по 8 полновозрастных коров: 1 – клинически здоровые животные, 2 – больные с субклиническим маститом, 3 – больные с сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита. В ходе исследований было установлено, что клиническое состояние у коров при субклиническом мастите находилось в пределах нормы, при этом наблюдали снижение молочной продуктивности, а у некоторых коров лёгкое угнетение. Молочная железа внешне не была изменена, но местами имела на ощупь незначительно плотноватую консистенцию. Соски находились в пределах нормы, а из сосковых каналов выделений не отмечено. Лимфатический узел молочной железы под кожей был незначительно увеличен и имел мягкую консистенцию. Размеры их варьировали в пределах 7,53×2,95, против 3,80×1,50 см у клинически здоровых коров. Поверхность разреза молочной железы была сочная и с нее иногда незначительно стекала серозная жидкость с желтоватым оттенком.
Гематологическими, биохимическими и иммунологическими исследованиями у больных коров как с субклиническим маститом, так и с сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита было выявлено, что показатели крови имели отклонения от физиологической нормы, а иммунные реакции организма были снижены.
Анализируя полученные данные (таблица 1), можно заметить, что в крови больных животных с сочетанной патологией наблюдали повышенное содержание лейкоцитов у животных в пределах 8,90 ± 0,56, в 1,8 раза больше по сравнению с клинически здоровыми животными.
Таблица 1
Показатели крови коров при субклиническом мастите и сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита
|
Показатель |
Группа |
||
|
первая |
вторая |
третья |
|
|
Эритроциты, 1012/л |
6,01±1,81 |
6,48 ± 0,58 |
6,25 ± 0,41 |
|
Гемоглобин, г/л |
101,23±0,27 |
109,24 ± 4,7 |
107,40 ± 5,06 |
|
Лейкоциты, 109/л |
5,06±2,03 |
6,84 ± 0,32 |
8,90 ± 0,56 |
|
Нейтрофилы, % : - юные |
0 |
0 |
0 |
|
- палочкоядер., % |
3,0±1,40 |
7,466 ± 0,20 |
5,466 ± 1,20 |
|
- сегментоядер., % |
18,0±2,80 |
20,066 ± 3, 50 |
21,066 ± 3,15 |
|
Эозинофилы, % |
3,5±0,61 |
4,20 ± 0,78 |
5,40 ± 2,68 |
|
Моноциты, % |
2,5±2,020 |
3,20 ± 1,17 |
3,166 ± 1,07 |
|
Лимфоциты, % |
63,1±1,20 |
42,90 ± 1,80 |
41,90 ± 3,90 |
|
Общий белок, г/л |
79,4±4,21 |
76,27 ± 2,40 |
78,77 ± 4,64 |
|
Белк.фракции: Альбумины, % |
42,3±1,33 |
35,19 ± 3,15 |
31,19 ± 2,585 |
|
α-глобулины, % |
13,02±0,20 |
14,10 ± 0,17 |
15,70 ± 3,05 |
|
β-глобулины, % |
12,8±2,11 |
13,28 ± 1,04 |
17,18 ± 1,03 |
|
γ-глобулины, % |
33,15±0,50 |
31,25 ± 1,08 |
29,985 ± 1,08 |
Повышенное содержание в сравнении с клинически здоровыми животными количества палочкоядерных лейкоцитов, при одновременном снижении количества лимфоцитов и повышении количества эозинофилов и моноцитов соответственно в 2,5 раза и на 60,0% во второй и третьих группах, свидетельствовало о более высокой интоксикации организма животных и одновременно о начале процесса нейтрализации интоксикации и удалении вредных метаболитов.
При исследовании показателей белкового обмена установлено, что содержание общего белка в сыворотке крови коров, больных субклиническим маститом, уменьшилось на 2,0%, а в сыворотке крови коров, больных с сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита,всоставе белковых фракций количество альбуминов уменьшилось на 11,0%, в то же время количество α- и β-глобулинов возрастало. Увеличение уровней последних показателей свидетельствовало об остром воспалительном процессе,осложненном инфекцией.
При изучении биохимического состава крови опытных коров выявлены следующие различия. Повышение содержания мочевины в крови 2 и 3 опытных групп, креатинина 1,5 и 1,4 раза в сравнении с первой группой животных, а содержание глюкозы уменьшилось, что свидетельствовало о снижении уровня углеводного обмена и соответственно биоэнергетических процессов, т.к. глюкоза является основным источником энергии для многих клеток организма. На долю глюкозы приходилось более 90,0% всех низкомолекулярных углеводов (таблица 2).
Таблица 2
Биохимические показатели сыворотки крови коров при субклиническом мастите и сочетанным течением субклинического мастита и послеродового эндометрита
|
Показатель
|
Группа |
||
|
первая |
вторая |
третья |
|
|
Мочевина (мМ/л) |
2,9±0,15 |
3,25 ± 0,23 |
3,507 ± 0,62 |
|
Креатинин (мкМ/л) |
60,2±2,56 |
93,24 ± 6,72 |
86,916 ± 8,56 |
|
Холестерин (мМ/л) |
2,36±,0,87 |
4,25 ± 0,81 |
3,153 ± 0,50 |
|
АлАТ (Е/л) |
25±2,50 |
28,06 ± 2,66 |
31,76 ± 3,66 |
|
АсАТ (Е/л) |
35±2,36 |
75,55 ± 6,54 |
78,87 ± 8,48 |
|
Глюкоза (мМ/л) |
2,3±1,61 |
1,53 ± 0,14 |
1,83 ± 0,14 |
|
Фосфор (мМ/л) |
1,7±1,02 |
2,02 ± 0, 31 |
0,92 ± 0,09 |
|
Кальций (мМ/л) |
3,0±0,98 |
2,99± 0,43 |
4,2 ± 0,14 |
Кроме того, обращало на себя внимание снижение в организме коров при сочетанном течении субклинического мастита и послеродового эндометрита фосфора и увеличение содержанияв крови кальция в 1,5 раза, что являлось следствием их низкого содержания в кормах в течение длительного времени, это в свою очередь вело к рассасыванию кальция из костной ткани и угнетению половой функции, не отражаясь существенно на функционировании других систем организма.
При гистологическом исследовании было установлено, что альвеолы молочной железы при субклиническом мастите у коров преимущественно были полиморфными, различной величины и содержали серозную жидкость с обилием жировых и молочных включений. Здесь же наблюдались единичные округлые шары с розоватой и гомогенной паренхимой, заполняющие 2/3 альвеол (Рисунок 1а).
|
|
|
|
|
|
а) |
б) |
в) |
г) |
Рис. 1.а) Структурные изменения в молочной железе у коровы при серозно-катаральном субклиническом мастите коров. Огромные округлые гомогенные образования в просвете альвеол. Окр. гем. – эозин. Ув. ок. 7, об.40; б) Выраженная воспалительная реакция на слизистой оболочке матки у коровы при гнойно-катаральном эндометрите. Окр. гем.-эозин. Ув. ок. 8, об. 40; в) Развитие серозно-катарального воспаления в молочной железе у коровы при субклиническом мастите. Окр. Азур-2 с фуксином основным. Ув. 400; г) Переход катарального воспаления в гнойно-катаральное в молочной железе у коровы при субклиническом мастите. Окр. гем.-эозин. Ув. ок. 8, об. 40.
При наслаивании к субклиническому маститу острого послеродового эндометрита на 10-12 дни после отела у коров клиническое состояние незначительно ухудшалось, хотя температура тела их находилась в пределах нормы (37,7-38,90С). Количество дыхательных движений составляло 14-17 в минуту, частота сердечных сокращений – 65-72 в минуту, а сокращений рубца – 2 – 3 в минуту.
У больных коров наблюдалось выделение из половых органов гнойно-слизистого экссудата полужидкой консистенции с желтоватым или буроватым оттенком в количестве от 75,0-95,0 до 240,0-275,0 мл. Особенно большое количество экссудата обнаруживалось утром на полу, после ночного отдыха животных. Экссудат отмечался также на корне хвоста и в нижнем углу вульвы в виде засохших корочек. Нередко больные коровы выгибали спину и становились в позу для мочеиспускания.
У коров на 10-12 сутки после отёла при ректальном исследовании матка прощупывалась в больших размерах, находилась в брюшной полости, слабо реагировала на массаж, после которого из половых органов выделялись лохии жидкой или полужидкой консистенции тёмно-бурого цвета с примесью незначительного количества слизи.
В целом, эндометрит у коров характеризовался катаральным выделением из матки при дефекации, мочеиспускании и, как правило, после ночного отдыха коров. Катарально-гнойный эндометрит протекал у коров при наличии выраженной воспалительной реакции на слизистой оболочке матки (рисунок 1б) [5]. При этом у тех коров, у которых происходили острые воспалительные процессы в матке в виде катарально-гнойного эндометрита, в структуре молочной железы воспалительные процессы обнаруживались вплоть до катарального – катарально-гнойного мастита (рисунок 1 в, г).
Изучение изменений белкового компонента молока коров провели на 14 день после отела коров. Обобщенные результаты исследований представлены в таблице 3.
Таблица 3
Характеристика белкового компонента молока коров при разных формах заболевания маститом
|
Показатель |
Группа |
||
|
первая |
вторая |
третья |
|
|
Общий белок, % |
3,64±0,011 |
3,81±0,017* |
3,64±0,032 |
|
в т.ч. казеин, % |
3,0±0,061 |
2,91±0,021 |
2,87±0,042 |
|
сывороточные белки, % |
0,67±0,012 |
0,91±0,011* |
0,78±0,013* |
|
∑ незаменимых аминокислот |
41,1±0,31 |
41,3±0,51 |
41,7±0,28 |
|
∑ заменимых аминокислот |
58,7±0,41 |
58,8±0,27 |
58,2±0,23 |
|
Скор эссециальной аминокислоты триптофан, % |
91,4 |
86,4 |
85,8 |
В наших исследованиях выявлено количество общего белка во второй группе относительно первой больше на 0,17 % (Р<0,05), а при сравнении с третьей они равны. Концентрация казеиновой фракции белков в первой группе относительно второй выше на 0,09 % (Р<0,05), а третьей – на 0,13 (Р<0,01). Содержание сывороточных белков, наоборот выше во второй и третьей группе соответственно на 0,28 % (Р<0,01) и 0,15 % (Р<0,05).
Это происходит потому, что при воспалении молочной железы коровы для устранения патогенной микрофлоры в её альвеолы и протоки из крови резко увеличивается поступление лейкоцитов и сывороточных белков. При этом снижается синтез казеина, но увеличивается количество общего белка за счет повышения уровня сывороточных белков и форменных элементов. Кроме этого, снижается биологическая ценность белкового компонента. Из-за разбалансированности незаменимых аминокислот и наличия лимитирующей аминокислоты триптофан белок молока имел невысокую биологическую ценность и больше это выражено во второй и третьей группе, то есть в молоке коров при разных формах заболевания маститом
Выводы
Таким образом, гематологические и биохимические показатели крови у коров при сочетанном течении субклинического мастита и острого послеродового эндометрита характеризовались нарушением углеводного, минерального и белкового обмена веществ. При этомснижалась активность окислительно-восстановительных процессов, снижался уровень резистентности организма с нарушением гомеостаза. Молочная железа у коров при субклиническом мастите на фоне послеродового эндометрита на ощупь имела плотноватую консистенцию, а ее подкожный лимфатический узел увеличивался, размеры его варьировали в пределах 7,53×2,95 см. Гистологически альвеолы преимущественно были полиморфными, различной величины и содержали серозную жидкость с обилием жировых и молочных включений. Местами альвеолярные перегородки расширялись за счет рыхлой соединительной ткани и кровеносных капилляров. Лактоциты местами вакуолизировались и значительно отторгались от базальной мембраны альвеол.
При этом с возрастанием количества соматических клеток в молоке увеличивалось содержание сывороточных белков, но снижалось количество казеинов. Из-за разбалансированности незаменимых аминокислот и наличия лимитирующей аминокислоты триптофан белковый компонент исследуемого молока имел невысокую биологическую ценность, и с повышением концентрации соматических клеток в молоке это выражалось в большей степени.
Список литературы
1. Баймишев М.Х. Профилактика послеродовой патологии препаратом цимактин / М.Х. Баймишев [и др.] // Успехи современной науки. - 2017. - Том 9. - №4. - С.7-11.
2. Зубова Т.В. Сравнительная эффективность применения препарата белмаст и раствора стрептоцида при лечении коров, больных субклиническим маститом / Т.В.Зубова, Е.А. Колокольцова, О.Н.Прохоров, Е.И. Сапарова // Успехи современной науки. - 2017. - Том 2. - №4. - С.139-141.
3. Коренник И.В. Основные аспекты лечения коров при эндометритах / И.В. Коренник, В.А. Титов // Ветеринария, 2016. ― № 1. ― С. 31-36.
4. Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследования крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях : метод.указания / под общ. ред. В.Т. Самохина. ― Москва: МСХ СССР, ВАСХНИЛ, 1981. ― 85 с.
5. Морфофункциональные изменения при остром гнойно-катаральном послеродовом эндометрите у коров/ О.Б. Павленко [и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. ― 2014. ― № 4 (24). ― С. 51-56.
6. Федотов С.В. Особенности белкового состава молока коров черно-пестрой породы при субклиническом мастите / С.В. Федотов, Н.С. Белозерцева, Г.М. Удалов // Ветеринария, 2018. ― № 2. ― С. 34-37.
7. Хромова Л.Г. Молочное дело : учебник / Л.Г. Хромова, А.В. Востроилов, Н.В. Байлова. ― СПб.: Лань, 2017. ― 332 с.
8. Dietary protein quality evaluation in human nutrition: Report of an FAO Expert Consultation. ― Rome: FAO, 2013 ― 66 p. Режимдоступа: http://www.fao.Org/3/a-i3124e.pdf. (датаобращения20.06.2018).
9. The assessment of amino acid digestibility in foods for humans and including a collation of published ileal amino acid digestibility data for human foods/Report of a Sub-Committee of the 2011 FAO Consultation on "Protein Quality Evaluation in Human Nutrition". Режим доступа: http://www.fao.org/ag/humannutrition/36216-04a2f02ec02eafd4f457dd2c9851b4c45.pdf (дата обращения 20.06.2018).
