ФЕДЕРАЛЬНЫЙ РОСТОВСКИЙ АГРАРНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР

346735, Россия, Ростовская область, Аксайский район, пос. Рассвет, ул. Институтская, 1

Телефон: +7(86350)37-3-89 +7(86350)37-1-75

Email: dzni@mail.ru

 

УДК 619:616:981.45:636.5:616.084

 

 

06.02.02 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

 

Анализ литературных данных о выделении чистой культуры возбудителя пастереллёза Pasteurellamultocida

Analysis of literature data on the isolation of a pure culture of pasteurellosis pathogen Pasteurellamultocida

Каширин Владимир Викторович - ведущий научный сотрудник, кандидат ветеринарных наук, Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт–филиал Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный Ростовский аграрный научный центр»

Kashirin Vladimir Viktorovich - Leading Researcher, Candidate of Veterinary Sciences, North Caucasian Zonal Research Veterinary Institute - Branch of the Federal State Budgetary Scientific Institution "Federal Rostov Agrarian Research Center"

В статье представлен аналитический обзор о выделении чистой культуры возбудителя пастереллёзаP. multocidaпо литературным данным и результатам собственных исследований.

The article presents an analytical review on the isolation of a pure culture of the pasteurellosis pathogen P. multocida according to literature data and the results of our own research.

Пастереллёз,P. multocida, диссоциация, условия восстановления, чистая культура, стандарт условий выделения, способ

Pasteurellosis, P. multocida, dissociation, recovery conditions, pure culture, isolation conditions standard, method

Пастереллёз («куриная холера», геморрагическая септицемия млекопитающих) вызывает бактерия Pasteurellamultocida, способная многих и много (multi) убить (cid), представленная С.Т. Rosenbuschи I.A. Merchant(1939) типовым видом рода Pasteurella[1, 6].Наиболее часто его используют в целях диагностики и таксономии. По определению микробиологии, диссоциация (разъединение) – появление в популяции бактерий особей, отличающихся от исходного типа внешним видом и структурой колоний, а также наследственно закреплёнными изменениями некоторых морфологических и биологических свойств [2]. Данные многих исследователей, в т. ч. и наши, показывают, что важным фактором вирулентности P. multocida служит капсула [4]. Утрата или же восстановление капсулы и, как правило, вирулентности P. multocida сопровождаются изменением морфологии её колоний [5]. Однако это характеризует изменчивость P. multocida, но не раскрывает условия её диссоциации. По этой причине не представляется возможным обеспечить единство методологии выделения чистой культуры P. multocida и достоверность оценки морфологических и биологических свойств бактерии. В этом заключается основной недостаток традиционного способа.Согласно принятому в микробиологии определению, чистая культура бактерий, выделенная из какого-либо источника в определённое время, называется штаммом. Также известно, что стабильность патогенных свойств микроорганизмов – важнейший показатель при их использовании [1,4].

Имеются сведения о том, что «носители» P. multocida –  потенциальный источник инфекции [2]. Бактерия локализуется, переживает, колонизирует и проявляет инвазивность на слизистых оболочках полости носа, рта, глотки [5]. Однако её избирательность паразитирования в этой области не раскрыта. Кроме того, заболевание пастереллёзом регистрируется в регионах с тёплым и умеренным климатом, возникает неожиданно (в виде «молниеносного» течения или внезапной «взрывной вспышки») при ослаблении естественных защитных сил организма под влиянием неблагоприятных факторов внешней среды, особенно резких колебаний температуры и дождей [2]. По нашим наблюдениям заболевание действительно часто и внезапно возникает при резких колебаниях температуры и дождливой погоде, характеризуясь, как правило, сверхострым течением в начале эпизоотии [6]. Смерть наступает так быстро, что классические патологоанатомические изменения, кроме геморрагий, не успевают развиться. При проведении опытов нами отмечена зависимость морфологических и биологических свойств P. multocida от пути заражения организма, инфицирующего материала, температуры и жидкой фазы окружающей среды [2, 4, 6]. В динамике размножения P. multocida в крови заражённых и погибших, а также в пробах крови, на жидкой и плотной питательной среде изучен морфогенез (формообразование), в т. ч. формирование капсулы и биполярности [1, 5]. Это позволило впервые установить функциональную морфо- и термолабильность P. multocida, объяснить условия вирулентности и диссоциации бактерии, раскрыть природный механизм пастереллёза [2, 3]. P. multocida выделяет экзометаболит. Из него при снижении температуры формируется капсула и, соответственно, повышается вирулентность бактерии. Изолированная в стерильной (чистой) воде бактерия сохраняет, а при контакте с питательной средой быстро утрачивает капсулу и вирулентность. Температура, как фактор воздействия на формирующуюся и сформированную капсулу P. multocida, предопределяет возможность проявления бактерией патогенных свойств и обусловливает закономерность возникновения пастереллёза в периоды резких колебаний температуры и выпадения дождей. Внезапное появление и неожиданное угасание эпизоотий пастереллёза – результат прямо противоположного резкого влияния низкой, умеренной и повышенной температуры окружающей среды на капсулу и патогенные свойства Р. multocida. Слизистые оболочки носовой, ротовой и глоточной полостей – природная область естественного носительства P. multocida (локализации, длительного переживания, колонизации и инвазивности), где бактерии свойственна функциональная морфо- и термолабильность в зависимости от температуры окружающей среды (в основном воздуха и питьевой воды). Именно здесь взаимодействие P. multocida и восприимчивого организма при ключевой роли температурного фактора определяет возможность начала воспалительного процесса (первичный аффект) и представляет собой естественный путь (механизм) заражения пастереллёзом [3,4]. С раскрытием природных условий развития пастереллёза окончательно определены недостатки традиционного способа и основополагающие отличительные признаки нового решения на способ выделения чистой культуры (штамма) возбудителя пастереллёзаP. multocida.

Ввиду функциональной морфо- и термолабильностиР. multocida, принципиальное значение в выделении и оценке её чистой культуры (штамма) представляют: путь заражения, масса тела восприимчивого организма, инфицирующий материал, температура окружающей среды (при заражении организма и при остывании трупа соответственно), время вскрытия трупа после смерти организма, глубина точки отбора инфекционного материала из трупа для бактериологического исследования.

Заключение.

Для обеспечения единства условий методологии выделения, оценки и применения чистой культуры (штамма) возбудителя пастереллёзаР. multocida разработан и предлагается для лабораторной практики способ (стандарт). Способ, включающий получение первой генерации микроорганизма на искусственной среде, отличается тем, что зараженную естественным путём или интраназально, или орально на слизистую оболочку носовой, ротовой, глоточной полостей и павшую от пастереллёза особь, выбранную из птицы или кролика, массой тела 350 г через 3 ч (при 20±1°С остывания трупа)  вскрывают, берут пробу крови из сердца и вносят в стерильную воду при температуре 20±1°С в соотношении 1:9 по объёму, осадок встряхивают и переводят во взвесь, затем центрифугируют при 1500 об/мин 5 мин; надосадочную жидкость как изолятпастерелл из крови в разведении 10-1 разводят до 10-2, 10-3 и высевают при температуре 20±1°С на питательный бульон и питательный агар, посевы культивируют 9-19 ч при 37°С и 1 ч при 20°С.

Полученную культуру оценивают чистой по строго типичной морфологии сплошного роста и однотипным колониям S-формы, по идентичным кокко- и диплококкоподобным капсулированным клеткам в полях зрения микроскопа, а также высокой вирулентности для восприимчивых лабораторных животных и птиц и с характерно выраженным свойством микробного антагонизма.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бакулин В.А. Кн.: Болезни птиц. - Санкт-Петербург, 2006. С. 256, 270.

2. Дейчман A.M. Природа происхождения и активизации инфекций // Энвайронментальная эпидемиология. 2011. №5. С. 813.

3. Каширин В.В. Методология выявления Pasteurellamultocida в крови зараженных и погибших птиц // Ветеринарная патология. - 2015. №3. С. 43-49.

4. Каширин В.В.  Восстановление и биологическая изоляция патогенных штаммов Pasteurellamultocida от птиц к моменту использования. Ветеринария. 2016; 11:24-29.

5. Rhoades K.R., Rimler R.B. Pasteurellamultocida Colonization and Invasion in Experimentally Exposed Turkey Poults // Avian Diseases. 1990. - Vol. 34. - P. 381-383.

6. Rosenbusch C.T., Merchant I.A. A study of the haemorrhagicsepticaemiaPasteurella // J. Bacteriology. 1939. - Vol. 37. - №1. - P. 69-89, 232-234. 16. N 4. P. 925-936.

 

 

Новости

29.09.2021 Получен патент на изобретение

Подробнее...

28 октября 2021 г.

28 октября во ВНИИВИВ-филиал ФГБНУ ФРАНЦ состоялось заседание Объединённого учёного совета. 

Подробнее...

Приказ 123 от 22.10.21 О проведении конкурса на замещение должностей

Подробнее...

Приказ 119/1 от 14.10.21 О проведении конкурса на замещение должностей

Подробнее...

16 сентября прошло очередное заседание Объединённого учёного совета

 

Подробнее...

Реализация семян в 2021 году

Своё Фермерство

Профилактика COVID-19

Реализация саженцев винограда в 2019 году

Создано в студии FRESH WEB   Все права защищены. ДЗНИСХ